一、为什么抗原修复只针对石蜡切片,而不是冰冻切片?
因为要提高免疫活性和染色效果。抗原修复只针对石蜡切片,由于石蜡浸渍后会使得组织细胞膜发生变化,需要切片进耐哗行手搜抗原修复来提高免疫活性和染色效果。抗原修复技术主要用于增强免疫昌薯行组织化学检测中的信号。
二、手术中冰冻切片后还要石蜡切片吗
您好!
做冰冻切片对病理医生的要求很高,不仅要求快(一般30分钟左右发出报告),还要准确可靠,但冰冻切片的质量一般不如常规石蜡切片,所以,遇到不能作出明确诊断时,要请手术医生再取材或等石蜡切片的结果,千万不能勉强诊断,那样会造成误诊甚至造成不可挽回的事故。
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三、组织内形成冰晶的数量与组织冷冻的速率成什么比
1. 冰冻切片是免疫组织化学染色中常用的一种型举方法。它的主要优点在于能够较好地保存多种抗原的活性,特别是细胞表面抗原,因此烂困建议优先选择冰冻卜历碧切片。无论是新鲜组织还是已经固定的组织都可以进行冰冻切片。然而,冰冻过程中组织中的水分容易形成冰晶,这可能会影响抗原的定位。冰晶的大小和数量会影响对组织结构的损害程度;冰晶越大,对结构的影响越小,而冰晶越小越多,对结构损害越大。在含水量高的组织中,这种影响更为明显。冰晶的形成数量与生长速度成正比,与成核率成反比,即冰晶越多越小,对组织的损害越严重。因此,应尽量减少冰晶的形成。Fish提出,冰晶形成的速率在冰冻初期较慢,随后迅速增加,在-33°C左右达到临界点,从-30°C到-43°C之间成核率急剧增加,之后再逐渐减慢。基于这一理论,可以采取措施减少冰晶的形成。
2. 石蜡切片具有组织结构保存良好的优点,在病理学和回顾性研究中具有重要的实用价值。石蜡切片可以制备出连续的薄片,组织结构清晰,抗原定位准确。用于免疫组化技术的石蜡切片制备与常规制片有所不同:首先,脱水和透明化过程应在4°C下进行,以尽量减少组织抗原的损失。其次,组织块的大小应控制在2cm×1.5cm×0.2cm,以确保组织能够充分脱水、透明化和浸蜡。最后,在浸蜡和包埋过程中,石蜡的温度应保持在60°C以下,使用低溶点的软蜡进行包埋效果最佳。
四、冰冻切片前的组织怎样保存?
正常情况下我们都是放在冰箱里面进行冷藏保存,适当的时候可以使用水进行浸泡,然后再切出来,这样丝毫不会影响它的口感,味道也会比较鲜美。
冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉),影响形态学观察。
冰冻切片是不需要固定的,冰冻切片新鲜取材后,应立刻放入冰冻切片机内切片。如不能立即切片,要放入液氮中速冻,然后放在-70度低温冰箱内长期保存抗原性不会丢失。
在手术台上取下的组织放到冷冻机里面-20度左右冻成硬块,制成切片用于快速诊断,该诊断仅作参考,应以石蜡诊断为主。
冰冻切片能做免疫组化,但通常需要双氧水处理。 头天做好,第二天做的话,切片通常有两种保存方案。1 在固定液中过夜。通常是4°保存。 2 水洗后过夜,但这个需要在湿盒中保存,也是4° 。但我个人喜欢1抗后过夜。
冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。
五、石蜡切片制作过程
石蜡切片制作过程如下:
切削很困难,而且无法得到十分菲薄的切片,因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用,并将整个组织块包住,然后再用精密的切片机制作切片,才能获得良好的效果。
这种方法称为包埋法,包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等,水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同,分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等,它们各有长处,可以根据需要选用,但是使用得最多的还是石蜡切片技术。
石蜡作为包埋剂,有其独特的优点,例如:石蜡能切出极薄的蜡片(2~10μm);切片时能连成蜡带,便于制作连续切片;操作较容易,组织块可以包埋在石蜡中长期保存。
然而石蜡切片的制作过程较长,步骤很多,一步不慎往往导致前功尽弃,而且这些处理引起组织块或多或少地收缩,切片时受湿度影响比较大,这些不足之处必须在制片过程中认真对待,尽量减小它的不良影响。
石蜡切片的制作过程主要包括:取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。
六、快速病理检查准确率多高
一般快速病理检查准确率非常高,接近常规病理检查。快速病理,准确说应该是快速石蜡病理,不同于术中快速冰冻切片,也不同于常规病理检查,一般快速石蜡病理检查具有制片质量好、时间短、病理诊断准确率高、病理报告及时、病理切片资料可以长期保存等优点,可以提高工作效率。快速石蜡病理检查有一定适应范围,其准确率还是比较高,基本上接近常规病理检查,一般适用各种活检小标本,比如内镜活检标本、支气管镜下活检标本或者B超、CT引导下穿刺等。一般肿物的部分活检也可以用快速石蜡病理做检查。
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