一、溶剂色浆须检测哪些物性?检测方法是怎样的?
如果是生产厂,一般只经验稳定性/平均粒径/含固量/色光。
二、怎样用722分光光度计测量溶液中红、黄、蓝三种颜料的含量与标准溶液中含量的百分比
1.先分别测定三种标准溶液的紫外-可见光谱,分别选择最大吸收波长附近吸收系数与其他两种的差值最大处作为该物质的测定波长。
2.在各自的测定波长分别测定并绘制三种标准物质的标准曲线。
3.测定待测溶液,在三个测定波长分别各测三次吸收值,各自取平均值。
4.将三个数值分别对应于各自的标准曲线进行定量。
5.计算浓度及百分比。
三、如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法
1,首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作。找出该药物的溶解性,探索出该药物的有效溶剂,使该药物能在该溶剂中充分溶解,这是药物溶液配制的前处理必然途径,也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件。
2,然后就是根据该药物配制溶液的前处理方法,配制好适当浓度的药物溶液,利用该药物溶液,在紫外-可见分光光度计上进行紫外扫描,找到该药物的最大吸收波长,确立适合的高效液相色谱分析的检测波长。因为它是进行高效液相色谱含量分析的基本条件
3,再是色谱柱的选择:根据药物的极性来选择合适极性的色谱柱类型
4,再是流动相的确立。配制一系列的流动相,考察合适的流动相。
5,再是准确度考察。通过精密度、重复性和重现性的考察来衡量仪器的准确度
6,接着是线性关系考察。配制不同浓度的一系列溶液,进行其溶液的色谱扫描。根据所得的不同浓度下的药物峰面积作为纵坐标(Y轴)、以溶液浓度为横坐标(X轴)进行线性回归,得到其线性图,考察其线性程度,即线性相关系数R=?。考察的目的就是:为了我们在做含量分析时,选择一个合适的浓度进行检测,不至于你配制的待测溶液浓度范围不在线性范围之内,造成测量结果的错误。
7,再是最低检测浓度和检测限的考察。目的是为了考察这种方法的实用性,是否符合痕量分析的要求。
8,再是回收率考察。目的是考察方法的准确性。
9,再是稳定性考察。目的是考察试验方法的时间性,指导我们在分析检测时,建立合适的溶液配制到进样的时间段,保证实验结果的准确性。
10,最后是专属性考察。
四、怎样验证绿叶中的色素吸收什么颜色的光
提取光合色素过程中,关键是速度。提取光合色素过程中,因为光合色素都是脂溶性的,因此用丙酮这种有机溶剂作为提取液,因为丙酮易挥发且有一定毒性,因此提取过程要速度要快,同时提取液要用胶塞塞好,以防止其挥发;利用二氧化硅硬度极大的特点,其粉末可增加研磨时磨擦力,加快研磨的速度;又因为叶绿素容易破坏,因此需要保护,而碳酸钙的作用是防止叶绿素被破坏;把绿叶剪碎的目的也是为了加快研磨速度。
划滤液细线是本实验的结果明显清晰的关键。滤液细线必须待第一次完全干燥后才能划第二遍,重复次数可多一些,滤液细线要齐、细、颜色深,其中齐更重要一些。
用纸层析法分离色素时,特别要注意滤液细线一定要处于层析液的上面,否则光合色素会溶解于层析液中,而不会沿层析液向上扩散、分离,这会使实验效果极差,甚至不发生分离,导致实验无效;另外,层析液是石油醚、丙酮、苯等有机溶剂的混合液,具有挥发性且有毒,要注意密闭。
用红、橙黄、绿、蓝紫色的薄膜,分别遮住同一光源。把盛有叶绿体的色素提取液的试管,分别放在红、橙黄、绿、蓝紫色光前、观察这些光透过色素提取液的情况。可明显地看到红和蓝紫色光透过的较少(暗),橙黄和绿色光透过的较多(亮)。分析这些现象,得出叶绿体中的色素,主要吸收红光和蓝紫光。在此基础上,出示教材中的光合色素吸收光谱曲线,分析总结光合色素吸收光波的不同特点。
五、PI 染色操作步骤
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PI 染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷的70%酒精,4℃固定30min,或是-20℃固定过夜。
4、离心,弃上清液。
5、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
6、加入RNase A (工作浓度20ug/ml)于500ul 1×PBS中,37℃孵育30min,离心。
7、用1×PBS 1ml洗涤1次,离心。
8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中,室温避光孵育30min。
9、混匀,过300目筛网,置流式管中, 4℃冰箱保存,待测。
GFP PI染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm , 5min,弃上清液。
2、加入PBS 1ml离心洗涤1次,弃上清。
3、加入2ml预冷PFA,PFA的浓度根据细胞的特点进行调节,4℃固定30min。
以下步骤同PI 染色操作步骤的(4-9)
细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中,离心,1500rpm,5min,弃上清液。
2、以冷PBA 1ml,离心洗涤,弃上清液。
3、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min-1h。
4、离心弃上清液。
5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次,以除去未结合的多余抗体成分。
6、向细胞中加入冷PBS 500ul,吹打混匀,置流式管中,4℃避光保存,待测。5、 PBA适当稀释的荧光素标记的第二抗体200ul。吹打混匀,4℃或置冰上孵育30min,避光。
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